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熒光分光光度計的使用需要注意哪些事項？
發(fā)布時間：
2021-01-26 00:00
熒光分光光度計是一種利用光的掃描原理來檢測樣品的儀器，光遇到樣品會產(chǎn)生反射、折射等物理現(xiàn)象，再通過專業(yè)的強(qiáng)光數(shù)據(jù)分析，將樣品的外觀形狀以及內(nèi)部結(jié)構(gòu)構(gòu)造反映在專家研究的圖譜上，從而方便專業(yè)人士的研究。那么，此產(chǎn)品是由哪些部分組成的？使用又需要注意哪些事項？
一、熒光分光光度計的組成：
1.光源：本儀器常用的光源有高壓氙燈、激光器和閃光燈等，高壓氙燈作為激發(fā)光源時，發(fā)出的連續(xù)光譜強(qiáng)度較大，是目前應(yīng)用較多的連續(xù)光源，一般高性能的熒光分光光度計會使用激光器作為光源，這種熒光儀可以對單分子進(jìn)行檢測，但是價格比較昂貴，且在使用上也有一定的限制。
2.單色器：儀器中的單色器是用來分離單色光的，且裝有激發(fā)單色器和發(fā)射單色器兩種單色器，激發(fā)單色器作用于光源和樣品室之間，用來篩選激發(fā)光譜，置于樣品室和檢測器之間的是發(fā)射單色器，可以篩選發(fā)射光譜。
3.樣品室：樣品室一般由石英池架或固體樣品架組成，本儀器使用的樣品室和紫外可見分光光度計用的具有較大的差異，而且在測量不同類型的樣品時光源和樣品的測量角度不同。
二、本產(chǎn)品的使用注意事項：
1.樣品應(yīng)盛在四面透光的石英比色皿（熒光池）中，如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。
2.在使用本儀器進(jìn)行熒光分析時，為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù)，一般需要開機(jī)預(yù)熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈，預(yù)熱時間可以縮短到10min左右。對某些易感光、易分解的熒光物質(zhì)，盡量采用長波長、低人射光強(qiáng)度及短時間光照。
3.溫度變化可引起本儀器熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度，有利于提高熒光量子產(chǎn)率，熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異，大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大，測試溫度變化不超過±3℃，對測試結(jié)果幾乎無影響。
4.當(dāng)本儀器的熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時，溶液的pH對熒光強(qiáng)度有較大影響。因為弱酸或弱堿在不同酸度中，分子和離子的電離平衡會發(fā)生改變，而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
5.熒光分光光度計的熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低，常見的熒光猝滅劑，如鹵素離子、重金屬離子、02、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象，因此，在較嚴(yán)格的熒光實(shí)驗中必須除02。
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